液相色谱仪填充色谱柱的固定相,由薄壳型填料到全多孔填料,由大颗粒到小颗粒,由全多孔粒子到灌流色谱的流通粒子,由全多孔球形微粒到非多孔的更小微粒。 在使用小粒径的填料会导致色谱柱高压力降低,使用现代高效液相色谱仪设备,其输液泵的操作压力基本已限定在35~40MPa,因此当欲用1~3μm的柱填料时,只能使用3~5cm的短色谱柱,这样通过调节柱长,而使所希望的柱效和柱压力降之间的矛盾得到妥善的解决,但此时只能使用较低的流速来实现快速分析。在高效液相色谱仪分析中,如欲在较短分析时间内获得高柱效,谱析色谱小编认为可以采用以下几种方法:
1.要想提相色谱仪的柱效,应当用小而均匀的固定相颗粒填充均匀,以减小涡流扩散和流动相传质阻力,这是最佳的提升柱效的方法。
2.改进固定相的结构,可以减小滞留流动相传质阻力以及固定相传质阻力。
3.选用低粘度的流动相(如甲醇、乙腈等),也有利于减小传质阻力,提高柱效。
4.合适的柱温,也会影响到柱效。
5.降低流速、增加柱长也可以提高柱效。
通过以上介绍可看出,在液相色谱仪分析过程中,各种因素是互相联系和制约的。只有通过对柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到最佳的工作条件。